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淺析圓筒實驗(cylinder test)的測試方法及注意事項

圓筒實驗(cylinder test)主要針對不對稱中Shu神經系統病癥,如帕金森病、阿爾茨海默病、腦卒中等,研究大鼠在貼壁站立過程中前肢的對稱性和使用率。實驗將大鼠置于一個透明的樹脂玻璃圓筒中3~10 min,攝像記錄其活動情況。圓筒的形狀能夠刺激大鼠用前肢垂直探索筒壁,記錄3 min內大鼠后肢站立時前肢*初承重觸及筒壁的次數,并分別記錄左、右側觸及和雙側觸及的次數。相關文獻報道,大鼠在局灶性腦缺血后,在圓筒實驗中前肢的使用情況具有不對稱性,且在前肢垂直探索筒壁的過程中,更傾向于使用正常前肢。




實驗方法

實驗準備

  1. *好在小鼠活躍期(暗循環)進行圓筒測試。
    注意:將所有測試的小鼠保持在反向光/暗循環上很方便。

  2. 在實驗前1天用防水記號筆標記老鼠的尾巴,這樣可以快速識別籠中的小鼠,并在測試前盡量避免高水平的壓力。

  3. 在1天中的同一時間進行所有行為評估。

  4. 將圓筒放在桌子或實驗室工作臺的中心。使用黑色窗簾覆蓋圓柱體的所有側面,以盡量減少對老鼠的視覺干擾。
    注意:在圓筒所在的表面上畫一條線,以確保圓筒可以返回到相同的位置。

  5. 在弱光條件下進行測試。黑暗的環境會激發老鼠的探索本能。在我們的動物設施中,我們使用天花板白光作為主要照明源。該光源由調光開關控制,可在圓柱體上方提供 40 勒克斯。
    注意:確保照明條件足以清楚地看到視頻記錄中圓柱體周圍的前肢使用情況。

  6. 在測試前讓老鼠適應測試室至少 30 分鐘。提供與測試相同的光照條件。讓老鼠不受干擾地休息。


行為分析


  1. 開始錄像。

  2. 用動物識別標記測試卡并記錄 3 秒。 

  3. 將老鼠放入玻璃圓柱體的中間并啟動計時器(下圖)。



數據分析

  • 計算右爪、左爪或雙爪的觸壁次數(同時雙爪接觸);

  • 將數據表達為受損前肢相對于總接觸的百分比 [(對側觸摸)/(同側觸摸 + 對側觸摸) x 100];



注意事項

  1. 玻璃圓筒的大小可能會根據小鼠品系的大小而有所不同。更大或更活躍的應變可以通過跳到氣缸的邊緣來試圖逃脫。在這種情況下,應使用更高的氣缸。我們在本協議中使用的氣缸適用于 C57BL/6 小鼠。

  2. 一些研究人員使用放置在圓柱體旁邊的鏡子來確保在視頻記錄中看到前肢。 

  3. 在測試之前不要使小鼠習慣于氣缸。這可能導致老鼠很少或沒有探索的傾向。

  4. 試驗持續時間因方案而異。5 到 10 分鐘的試驗足以獲得足夠數量的運動以進行可靠測量。在這段時間之后,大多數老鼠都不太活躍。

  5. *好在隔音室中進行此測試,因為大聲的噪音會分散鼠標的注意力。如果無法做到這一點,請在門和附近區域添加一個顯示“正在進行實驗”的標志,以消除任何對話。

  6. 大多數研究通常每組使用 8 到 10 只小鼠。

  7. 進行行為分析的實驗人員不應該對被小鼠可見。



動物行為分析軟件:

1. VisuTrack軟件

2. SuperMaze軟件

3. FishTrack斑馬魚分析軟件

動物行為儀器:

1. 自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射(PPI)、跑步機、各類經典迷宮等

2、動物抓撓分析儀、動物震顫行為分析儀、動物捕食行為分析儀

3、動物主動步態分析、動物被動步態分析、動物自由步態分析(內測中)

4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉棒疲勞儀、鼠尾光照測痛儀等

神經電生理:

1、光遺傳、無線光遺傳

2、光纖記錄系統(單通道、多通道)

3、電生理信號采集系統(腦電、肌電等)

 



滬公網安備 31011202007432號

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