<p id="ex3ho"></p>

<button id="ex3ho"></button>

<button id="ex3ho"></button>

所在位置: 首頁 > 技術支持 > 技術詳情

Brit J Pharmacol︱中國藥科大學汪豪課題組揭示AMPK作為抗抑郁潛在靶點的新發現

抑郁癥是普遍的神經精神病疾之一,全球患病率超過4.5%,其特征是持續情緒低落、興趣減退、食欲、睡眠和認知功能受損。目前可用的抗抑郁藥通常是有效的,但一些副作用,包括昏迷、癲癇發作和心臟毒性,限制了它們的廣泛分布。此外,近一半的抑郁癥患者未能獲得持續緩解,約三分之一的患者對任何干預措施均無反應。

2023年1110日,中國藥科大學汪豪課題組 British Journal of Pharmacology 發表研究論文,題目為《Kaempferol-3-O-sophoroside contributes to modulation of depressive-like behavior in C57BL/6J mice by activating AMPK》。研究表明,PCS-1與AMPK結合,促進BDNF的產生和自噬的增強,結果達到抗抑郁作用。本研究為藏紅花花瓣的臨床應用提供了支持,并為AMPK作為抗抑郁的潛在靶點提供了進一步的證據。


1

PCS-1對誘導的PC12細胞損傷的保護作用和抗氧化作用


700 μM CORT可顯著降低PC12細胞活力,降低至50%左右。然而,PCS-1 treatment的劑量依賴性地改善了細胞損傷。雙染色顯示,PCS-1有效抑制了CORT誘導的PC12細胞凋亡。Western blot分析顯示,與CORT處理相比,PCS-1處理后Bcl-2/Bax的比例增加,caspase-3和caspase-9的活性降低。此外,PCS-1還降低了ROS水平和MDA含量,增加了SOD活性。這些結果初步提示PCS-1在體外可能具有抗抑郁樣的特性。



2

PCS-1改善了小鼠的抑郁樣行為


本研究采用CORT誘導的抑郁小鼠模型和CUMS模型,通過多種行為測試來評價PCS-1在體內的抗抑郁樣活性。皮質酮暴露的小鼠的體重增加明顯少于對照組,但PCS-1 treatment改善了皮質酮引起的體重減輕,尤其是在高劑量組,其表現優于FLU組。CORT處理小鼠SPT的蔗糖偏好降低,TST和FST的靜止時間增加,PCS-1(10和20 mg/kg)或Flu treatment減輕了CORT暴露小鼠的抑郁樣行為。PCS-1(10和20 mg/kg)或Flu treatment顯著改善了皮質酮誘導的運動活動的減少。此外,CORT treatment小鼠的海馬體積也小于對照組小鼠。經Flu或PCS-1 treatment后,海馬體積明顯增加。這些結果表明,PCS-1改善了抑郁樣行為,并可能與抑制海馬萎縮有關。

  • 蔗糖偏好實驗(sucrose preference test,SPT)

在SPT之前,所有小鼠都被單獨飼養,并在1%的蔗糖溶液中放置24小時。然后,在缺水12小時后,給每只小鼠提供兩個裝有1%蔗糖溶液和自來水的預稱重瓶。6小時后隨機并相互交換兩瓶酒的位置,以避免空間偏好。12小時后測量并記錄蔗糖溶液和水的攝入量。蔗糖偏好(SP)值計算如下:SP(%)=蔗糖攝入量(g)/[蔗糖攝入量(g) +水攝入量(g)]×100%。

每只小鼠分別暴露在一個透明圓柱體(20厘米直徑20厘米),其中包含大約20厘米的水(22°C-25°C)中訓練15 min。24小時后再次將其放入氣缸中,游泳6 min,取其中4次min記錄靜止時間。

每只老鼠都被單獨暴露在一個訓練期間,以避免實驗期間的干擾。將小鼠放置在地板上方20厘米處,倒掛6 min,適應2 min后,在接下來的4個min中測量靜止時間作為絕望的指標。



3

PCS-1在體內抑制氧化損傷和細胞凋亡

評價CORT誘導小鼠海馬中的氧化指標,進一步評價過度氧化應激在抑郁癥發病機制中的作用。結果顯示,與模型小鼠相比,PCS-1處理降低了ROS和MDA水平,提高了SOD活性。此外,PCS-1改善了CORT誘導的海馬中Bcl-2/Bax比值的降低,并增加了海馬中caspase-3和caspase-9的表達。這些結果提示,PCS-1可能通過抑制氧化和凋亡系統,對CORT誘導的海馬損傷發揮神經保護作用。



4

PCS-1提高了皮質酮抑制的PC12細胞中BDNF的水平,

并增強了初級海馬神經元的神經元分化

采用ELISA法檢測CORT處理后的PC12細胞中BDNF的水平。與CORT處理組相比,Flu或PCS-1顯著提高了BDNF的水平,細胞immunity熒光實驗進一步證實了這一點。Western blot結果顯示,CORT降低了PC12細胞中BDNF、p-TrkB和p-AKT的表達水平,然后PCS-1逆轉了這些表達水平。PCS- 1處理有效地保護了Neuro-2a細胞免受CORT誘導的損傷,導致神經突的形成和延伸以劑量依賴的方式增強。此外,PCS-1單獨對Neuro-2a細胞具有增殖作用,促進神經突的形成和延伸,特別是在濃度為100 μM時。immunity熒光檢測顯示,與對照組相比,pcs-1處理的初級海馬神經元中MAP2(樹突指標)和Tau(軸突指標)的表達水平顯著升高。同時,PCS-1的使用增加了初級海馬神經元的突起長度和分支數量。這些結果表明,PCS-1可以上調BDNF的表達,從而促進神經元分化和神經突起延伸。

 



結論



綜上所述,藏紅花花瓣的主要活性物質PCS-1顯著改善了CORT和CUMS小鼠模型的抑郁樣行為,促進了海馬BDNF的產生,減弱了CORT誘導的海馬萎縮,誘導自噬減少了NLRP3神經炎癥。結果表明,PCS-1是一種潛在的AMPK激活因子,通過與AMPK結合,促進BDNF的表達和誘導自噬。本研究初步闡明了藏紅花花瓣的藥效學物質基礎和抗抑郁機制。此外,結果進一步證明AMPK激活介導的BDNF增加和自噬增強可以改善小鼠抑郁癥狀。


更多信息

如果您也對動物實驗感興趣,歡迎關注和推薦關注微信公眾號:腦聲常談,知鼠科學,專注于動物神經科學與行為學的實驗知識的方法傳播與分享交流,您可以推薦給您身邊的朋友、同學以及老師,我們會定期更新您需要的相關實驗方法的視頻和文章,希望能對大家帶來幫助!

對實驗設備有興趣的小伙伴可以聯系知鼠達理劉工13262879783


滬公網安備 31011202007432號

中文字幕无线观看中文字幕_制服丝袜香蕉在线视频_午夜免费一区二区三区最新_欧美伊人久久大香线蕉综合
<p id="ex3ho"></p>

<button id="ex3ho"></button>

<button id="ex3ho"></button>